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房水疱疹

发布时间: 2022-05-12 18:34:15

❶ 成人水痘如何治疗,应注意什么

水痘的治疗以对症处理及预防皮肤继发感染为主,一般不需用药,但应加回强护理。
因水答痘通过飞沫及接触传播。所以如果家中有小孩尚未患过水痘的,应予以隔离至全部疱疹干燥结痂。
发热期应卧床休息,给予易消化的饮食和充足的水分,剪短指甲,避免抓伤,勤抵换衣服,保持皮肤清洁。
对症处理方面:高热时可给予退热剂。皮肤瘙痒者可口服抗组织胺药物或涂以炉甘石洗剂。疱疹破裂处可涂以1%龙胆胆紫。忌用肾上腺皮质激素类药,因其可使皮疹泛化,病情加重。
水痘如无继发感染者,脱痂后不会留有疤痕。

❷ 疱疹怎么引起的

主要是病毒引起的,属于病毒性疾病。生殖器疱疹的危害大,易传染家庭及其社会其他人,传播途径有以下几种:
1)直接性接触传染:通过与生殖器疱疹患者的性接触传染,包括性生活、热烈的接吻、体肤接触的拥抱。生殖器部位的皮肤粘膜菲薄,血管丰富,性生活时处于极度充血状态,性生活摩擦可造成细微的损伤,为生殖器疱疹病毒的入侵创造了条件。
2)间接接触传染:凡是生殖器疱疹患者使用过的衣服、被褥、马桶和浴巾等均可能被患者的分泌物污染而带上生殖器疱疹病毒,与生殖器疱疹病人密切生活在一起的健康人,当轻微的伤口接触到这些沾有病毒的物品时,就容易感染上。
3)胎盘传染:患生殖器疱疹的孕妇可通过胎盘而使胎儿传染生殖器疱疹。孕妇患有生殖器疱疹,未经及时发现和治疗,或治疗不彻底,生殖器疱疹病毒可通过胎盘的血液循环传染给胎儿,使胎儿感染生殖器疱疹。
生殖器疱疹的治疗医院。。郑州警备区医院唯一的按照国家三甲标准建设的大型性病医院。
4)血源性传染:有些在潜伏期的生殖器疱疹患者,体内虽感染有疱疹病毒但可以无临床表现,健康者或其他各种疾病的病人输入了由他们提供的血液或血液制品,就可以使受血者感染生殖器疱疹。
5)产道传染:当胎儿通过感染有生殖器疱疹的产道时,产道部位的生殖器疱疹病毒可通过产道感染给胎儿,导致新生儿感染生殖器疱疹而发病。

❸ 带状疱疹应该怎么治疗啊

带状疱疹的治疗方法包括:
1、抗病毒治疗越早越好,72小时内疗效相对较好。感染版超过7天,抗病毒治疗的意义权不大,一般抗病毒治疗7-10天已经足够;
2、应用维生素B1、B12、甲钴胺营养神经,促进神经修复;
3、带状疱疹常伴有神经性疼痛,应用止痛药物缓解症状、改善睡眠;
4、中医和中药对带状疱疹疗效显著,可以根据病情选用清热解毒、活血化瘀、止痛的药物治疗,中医拔罐疗法和放血疗法也有很好的疗效;
5、外用药物可以起到抗感染、止痛或促进水疱干涸的作用

❹ 我出了水痘,但没发热症状,很希望去上班,我想知道传染给同事的几率会很大吗

水痘

水痘是春天的流行传染病,患者多是一至十四岁的孩子,在学校和托儿所较易受感染得病。

病原体:水痘-带状瀄疹过滤性病毒
病毒在感染的细胞核内繁殖,形成嗜酸性包涵体,病毒存在于疱疹的疱浆内,血液和咽分泌物中,通过接触或飞沫传染,传染性极强,易感者于接触后约90%发病。病毒在体外生存能力很弱,能被乙醇灭活,1次患病可获终身免疫。

现代医学病理:

病毒经口鼻进入人体,首先在呼吸道粘膜细胞内繁殖,然后进入血液产生病毒血症。水痘的疱疹只限于表皮的棘状细胞层,有退行性病变和细胞内水肿,形成囊状细胞,由于细胞的裂解、液化、和组织液的涌入,形成单房性水疱疹(天花则形成多房性疱疹),真皮层有毛细血管扩张和音核细胞浸润。粘膜疹病变与皮疹相似。

中医病因病机分析:

中医认为本病为外感时行邪毒,多由口鼻而入,蕴郁肺脾。肺合皮毛,主肃降,外邪袭肺,宣降失常,初期多见肺卫症状,如发热、咳嗽、流涕等。若肠胃伏有湿热,或病毒深入时,则可出现气分症状。脾主肌肉,邪毒与内湿相搏,外发肌表,帮故有水痘布露。本病多属于风热轻证,时行邪毒清透即解。因本病邪毒一般只伤及卫、气分,窜入营血的甚少,故病情较天花、麻疹为轻,预后良好,变证险证也少。少数患儿因毒热炽盛,内犯气营,甚或营血受累,重的可伴有高热、烦躁、面赤,痘点稠密,色赤,紫暗等重症。
治疗]
本病无特效治疗,主要是对症处理至预防皮肤继发感染,保持清洁避免瘙痒。疱疹破溃或继发感染时局部可涂1%甲紫,未破溃者可用炉甘石洗剂涂抹。早期采用阿精胞甘10mg/kg/日或用无环鸟苷8mg/kg/日,用5~7天,或加用干扰素,可抑制病毒的复制。每日肌注维生素B12500~1000ug,也有一定的疗效。有继发感染时可选用有效的抗毒素,水痘不宜使用激素以免引起病毒播散。

❺ 为什么会得疱疹

1、棘层松解:由于表皮细胞间桥(桥粒及张力细丝等)的,细胞间失去了紧密的联内系而成松解状态,容因此形成表皮内的裂隙、水疮或大抱。引起棘层松解的理由有自身免疫起因,如天疱疹。遗传起因引起的棘层松解见于慢性家族性良性天癌疮、毛囊角化病。
2、基底细胞液化及基底膜病变:基底细胞液化是指表皮基底细胞发生空泡化或破碎,重者基底细胞层消失,棘细胞直接与真皮接触,免疫、遗传及药物过敏常是引起基底细胞液化的理由,见于遗传性大癌性表皮松解症、系统性红斑狼疮、皮肌炎、多形性红斑、药疹、大疮性扁平苔薛。基底膜病变是指在基底膜有自身抗体沉积或先天性病理缺陷,原由于自身免疫及遗传,由于基底膜病变引起的水痢疾病有大癌性类天疱疹、妊娠疱疹、原痕性类天疱疹、疱疹样皮炎、线状k人大抱病、获得性大癌性表皮松解症、先天性大病性表皮松解症、色素失禁症。
3、气球及网状:由于细胞内水肿,表皮细胞体积增大,形成气球状,细胞膨胀破裂、邻近残留的胞膜联成多数网状中隔,最后形成多房性水疮,多见于病毒感染性皮肤病
4、带状疱疹的病因:是由过滤性病毒、外伤、梅毒、脊髓疾病、砒霜中毒引起的。

❻ 这是什么病

帮助你吗?
虹膜睫状体炎
[概述]

前葡萄膜炎(前葡萄膜炎),也被称为虹膜和睫状体炎(虹膜睫状体炎),虹膜发生炎症往往会影响睫状体,它是一个独立的临床虹膜炎或虹膜睫状体是罕见的。通常在相同的疾病。
[治疗]

急性虹膜虹膜睫状体炎必须诊断的准确性和及时治疗前,他们消除失明的危机,以更好地保护视力,其治疗原则如下: BR />
1散瞳:一旦确诊,立即扩张,使瞳孔扩大,这是主要的治疗措施。如果延迟,难免会导致无法挽回的后果。

散瞳药物阿托品1%阿托品眼药水,一天三至六倍,直到瞳孔放大,炎症和解决后,每日1次或2次,以保持扩大瞳孔炎症消退后半月一月。合并的目的。

阿托品的睫状肌机松弛,以纾缓压力的动脉,的葡萄膜炎,以促进血液循环,降低毛细血管通透性,减少渗漏,发挥抗炎作用,促进炎症吸收。此外,散大瞳孔,以防止粘连或消除的形成,缓解或减轻瞳孔括约肌和睫状肌痉挛。眼睛好好休息,以达到止痛的目的。

滴用阿托品时候,必须压迫泪囊部,为了避免泪囊和鼻黏膜吸收中毒,特别是对儿童使用的必须是谨慎的,特别是对老年人是一个前房狭窄与青光眼品质,犯错上侧的谨慎。

如阿托品扩瞳,再加上1%的可卡因和0.1%肾上腺等量的粘连混合的0.3毫升,附近球结膜下注射,所谓的强大的瞳孔扩大。

应用皮质类固醇激素:使用糖皮质激素可以减少和控制炎症,起到抗炎和抗过敏的作用,降低毛细血管通透性,减少组织水肿和渗出,减少纤维组织增生和胶原沉积。过敏反应的抑制作用。服药两个多星期,而不是??突然停药。适当减量。
的管理方法:口服药物,眼药水或结膜下注射:口服药开始给予足够的数量,以迅速控制炎症,最后,最小,最保持炎症活动消散根据。

前葡萄膜炎局部地塞米松0.5%松木或0.05%,每日4?5次,或一小时的时间点,疗养减少。有时也可以结膜下注射。

葡萄膜炎或脉络膜炎患者,可用0.025%地塞米松0.3毫升结膜和眼球筋膜注射,或全身用药相结合的,病重的氢化可的松200?250毫克或地塞米松5?10mg静脉滴注,每日一次,所以有足够的数量可以达到的眼组织。

3。非甾类抗炎剂:水杨酸钠保泰松和吲哚美辛,镇痛和抗炎作用。主要抑制前列腺素的增加,以实现的作用,抗炎或降压,共同阿司匹林0.5克,每日3次,每天消炎痛25mg三次前房中的葡萄膜炎。

4。抗生素:如果系统之前,化脓性葡萄膜炎可局部或全身应用广谱抗生素。

5。免疫治疗:严重的葡萄膜炎和交感性眼炎,免疫抑制剂或免疫增强剂,可以考虑使用激素是无效的。要调节免疫功能异常,常用的免疫抑制剂:

的⑴环磷酰胺(环磷酰胺):可单独使用,或与类固醇治疗,常用的口服剂量为50至100mg,每日两次点服务,即使两个周为一疗程。静脉注射100?200毫克溶于20毫升生理食盐水洗涤,每天或每隔一天。血液进行检查,以防止癫痫发作的副作用。

⑵乙双吗啉(AT-1727),各0.4克,1日3次,连服2?3周,停药一周,然后一两个疗程。

⑶疼痛可以是相当(chlocambucil,Leukeuan,苯丁酸氨芥末的):平均每日自2毫克,重的每天2?10毫克,每日最大剂量不超过20mg。

使用免疫增强剂左旋咪唑对免疫功能低下者。

6。热敷或短波疗法:扩张血管,促进血液循环,促进炎症的吸收。

7。对症治疗

口服对乙酰氨基酚酰胺(1)继发性青光眼眼压下降。

⑵可行虹膜穿刺或虹膜切除术虹膜膨隆。

⑶周边虹膜粘连,导致继发性青光眼可行的周边虹膜切除术。

⑷炎症控制下行白内障摘除术并发性白内障。

临床表现

首先,症状

疼痛,畏光,流泪,视力下降等症状的疾病。

虹膜睫状体三叉不是一点点的毒性刺激,睫状肌的收缩和肿胀组织的压迫反射到眉毛和脸颊,疼痛,睫状体部有压痛,疼痛,夜间尤甚。急性期常伴有角膜炎症反应,羞明流泪视力可突然下降,由于角膜水肿,角膜沉淀物和炎症渗出物的影响光线进入,睫状肌会发生反射性痉挛,炎症刺激引起假性近视。晚期黄斑水肿,视神经视网膜炎。

的迹象

1。睫状充血:睫状充血,严重者还可形成混合充血,结膜水肿。
2。角膜沉淀物(角质沉淀,KP):房屋水肿炎性细胞和颜料由于角膜后面和虹膜的表面之间的温度差,在离心力和重力的影响前房房水对流粗糙角膜内皮细胞粘附炎症,角膜沉淀物。平静的复杂的多沉积在角膜三角分布的中心的下侧,尖端朝向瞳孔区,旁边大颗粒,小颗粒在上部。

根据炎症的性质,渗出液的严重程度,时间的长度,大小和形状不同的表现形式,数量各不相同。大的灰白色羊脂像KP的特点是慢性炎症,,细灰灰尘像KP多见于急性或过敏性肉芽肿性疾病。个人也正常白的KP,无虹膜炎的表现,生理KP,应该读结合其他临床症状鉴别诊断。

3。房水混浊:炎症的蛋白质含量增加房水,房水变混在裂隙灯苍白的色彩还原反射反光带被称为丁达尔征房水。表现为活动性炎症的迹象。可能是严重的纤维素性脓性渗出物沉积液平面的前房积脓(hypopion)的前室的下部,由于重力关系。如果血管破裂,红细胞溢出,从而产生前房出血(前房积血)。

4。虹膜不清:虹膜炎,虹膜血管扩张水肿浸润,颜色变暗,虹膜表面纹理不清,肉芽肿性虹膜睫状体炎,虹膜结节,深深浅浅的。深位于边缘的瞳孔是半透明的灰色小的说koeppew结节,多见于亚急性或慢性炎症早,数量的多少不同,可以在几天内消失。虹膜卷曲轮布萨卡结节附近的浅结节。此结节可很快消失,偶尔的老龄化和新生血管形成。炎症反复发作,虹膜萎缩,形成的表面上的机器膜和新生血管,虹膜修复状态。

5。瞳孔缩小:炎症早在虹膜,虹膜充血,水肿,细胞浸润,渗出LPS瞳孔括约肌和开放的主要肌肉同时收缩,而表现出瞳孔缩小,对光反应平淡。

6。玻璃体混浊:睫状体和玻璃体相邻足虹膜睫状体细小的灰尘和絮状渗出和炎症可侵入晶体后腔及玻璃体前,浑浊。

并发症

角膜混浊:后弹力层皱褶性角膜炎和角膜上皮水泡样病变,晚期角膜带状疱疹发生之前。
2。虹膜后粘连:虹膜炎,虹膜瞳孔缘晶体前囊之间的粘连,纤维蛋白渗出。可用于早期粘连扩张剂开设。如果的渗液机公司的附着力扩张剂是不容易拉,拉的粘连,瞳孔的一部分,不是全部的花瓣般的边缘。

3。瞳孔阻滞(隐居的瞳孔)从来没有拉虹膜粘连纤维化不开,的学生每周光圈,镜头后面的表面是完全粘连,前后房水循环中断。

4。虹膜周边前粘连(的虹膜周边前粘连)或房角粘连(房角粘连)。后房压力增加或渗出液积聚的周边虹膜或虹膜与角膜后面粘连。

5。的瞳孔膜门襟(闭塞瞳孔):大量的渗出液,以形成薄的膜,其覆盖的晶体的前表面的瞳孔区域的沉积。

6。虹膜膨出(虹膜膨隆):由于房水不能流从里屋,挡在后面的房间,使室内压力,房水积聚虹膜向前膨隆状态。

7。并发性白内障:虹膜炎症,房水,房水的炎症有毒性质的变化改变了晶体的外部环境,从而改变晶体正常的生理代谢,导致晶体前后皮质混浊,并很快形成一个完整的白内障。

8。继发性青光眼:由于房角粘连,瞳孔阻滞,急性炎症的血管扩张,血浆渗出,导致眼压增高,继发青光眼房水粘度增加。

9。视网膜病变:病变后期或严重的情况下可能会并发黄斑水肿或囊性变,或伴有视盘血管炎。

10。眼球萎缩:附近睫状体渗出机组织形成纤维膜牵拉性视网膜脱离,破坏睫状体房水分泌减少,降低眼压。加上睫状体本身反复发炎,坏死组织,并引起眼球萎缩,萎缩。

❼ 人们为什么会患上带状疱疹呢

您好,带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性炎症性皮肤病,民间俗称缠腰蛇,过腰蛇,火丹,在颈部叫锁颈蛇,中医叫生蛇。带状疱疹后神经痛是指带状疱疹发生三个月后疼痛持续存在,发生原因是由于疱疹病毒对周边神经的破坏,造成神经传导疼痛的过程异常,严重影响患者的生存质量。

❽ 生殖器疱疹的症状有哪些

一、症状
HSV感染是一种全身性疾病,病毒经呼吸道、口腔、生殖器粘膜或破损皮肤进入人体,可潜于人体正常粘膜、血液、唾液以及局部感觉神经节和多数器官内,几乎所有的内脏和粘膜表皮内都可分离到HSV。
原发感染多为隐性,大多无临床症状或呈亚临床表现,仅有少数(约1-10%)可以出现临床症状。主要见于免疫功能低下婴幼儿或严重营养不良或有其它感染的儿童,成人罕见。原发感染消退后,病毒可持续潜居体内。正常人中约有半数以上为本病毒的携带者,可通过口、鼻分泌物而成为传染源,由于HSV在人体中不产生永久免疫力,故每当机体抗病能力减退时,如患某种发热性传染病,胃肠功能紊乱、月经、妊娠、病灶感染、过度疲劳、情绪环境改变时,体内潜伏的HSV即被激发而发病。
HSV-1主要引起口唇疱疹,咽炎,角膜结膜炎和散发性脑炎,而HSV-2感染主要引起生殖器疱疹,但在临床上也有相反情况。
HSV感染的潜伏期为1-45天,平均为6天,HSV-1感染主要发生于口角、唇缘、鼻孔等皮肤粘膜交界处,亦可见颜面或口唇,开始局部先有灼痒及轻度紧张感,偶有伴发神经痛。随即出现红斑,在红斑基础上发生簇集性小丘疹,迅速变为粟粒至绿豆大小的水疱,内容澄清,水疱破裂后出现糜烂面,数日后干燥结痂。自觉灼痒,偶有倦怠,不适和轻微发热等全身症状,愈合可遗留暂时性色素沉着。全病程1-2周左右。
HSV-2感染主要发生于生殖器部位,患部先有烧灼感,很快在红斑的基础上发生成群的小水疱,多见男性包皮、龟头、冠状沟、阴茎等处,偶见于尿道;女性常见于阴唇、阴蒂、阴道、宫颈等处。水疱可逐渐变成脓疱,约6天左右破溃而形成糜烂或浅的溃疡,自觉疼痛。病人可发生尿道炎,出现排尿困难。多数人有腹股沟淋巴结肿大疼痛,有的病人可出现发热、肌肉痛及脑膜炎症状。如发于女性宫颈者可形成溃疡坏死,阴道分泌物增多,可有下腹痛。应注意有无宫颈癌发生。孕期患生殖器疱疹时易致流产、早产或死胎,并易使新生儿感染,发生新生儿单纯疱疹。本病一般经过3周左右可以痊愈,但常有反复发作,一般原发疹后1-4个月内复发,症状较原发者轻,范围亦小,局限于生殖器部位,有时仅有1-2个疱疹,病程亦短,自发病至愈合8-12天。本病也可伴有生殖器以外部位的感染,如口唇、臂部及中枢神经系统等。
二、体征
皮损为红斑基础上可见成群的水疱或脓疱或成糜烂及溃疡。女性患者约90%伴有HSV宫颈炎,宫颈可见发红、糜烂、溃疡,有脓性阴道分泌物。有的患者可有腹股沟淋巴结肿大压痛或体温升高。皮肤病变也可出现在口唇、手指、臀部、大腿、手臂,甚至眼部与咽喉。并发脑膜炎或横贯性脊髓炎,一般于发疹后3-12天出现颈项强直等颅内压增高的现象。
三、潜伏感染和复发
HSV感染人体后1周左右,血中出现中和抗体,3-4周达高峰,可持续多年,这些抗体能清除病毒和使机体康复,但大多数个体不能彻底消灭病毒,也不能阻止复发,病毒以潜伏状态长期存在宿主体内。不同亚型HSV感染者急性首发生殖器疱疹的临床过程相似,但生殖器病变复发率不同,首发HSV-2感染者约90%,在12个月内会出现一次复发(平均复发4次),而初次感染HSV-1者仅50%出现类似复发(平均复发次数小于1)。不同个体及同一病人一生中生殖器HSV-2感染的复发率变化很大,大多数年复发5-9次,一般在原发疱疹消退后1-4个月内发生,有些患者受到促发因素,如发热、月经、日晒、寒冷、某些病毒感染等的影响而复发,其特点是每次复发往往发生在同一部位,复发前可有前驱症状如局部瘙痒,发疹前数小时感染部位有灼烧,麻刺感。
复发生殖器疱疹(GH)对患者心理影响较大,由于目前尚无预防复发的有效疗法及可能有诱发生殖器恶变的危险性,故给患者带来心理影响,患者多有抑郁、恐惧等心理障碍,这又直接影响HSV的复发。我们的治疗经验,只要患者坚持规律治疗,都能治愈。
四、HSV与HIV感染:
HSV常与HIV-1同时感染,并能促进病情发展,引起严重的局部和播散性感染。目前认为HSV是一种调节因素,能激活HIV复制,Heng对6例AIDS合并生殖系统HSV皮肤损害患者进行皮肤活检,发现角化细胞和巨噬细胞均有HIV-1和HSV-1杂交后使HIV-1保留其感染性,而无需与CD4分子结合即能进入细胞内。此外HSV-1能刺激潜伏型HIV-1,而增加HIV-1/HSV-1共同感染和在组织中的复制。
表皮细胞发生气球样变性,其中可见有嗜酸性包涵体。表皮开始为网状变性形成的多房性水疱,以后聚合为单房性水疱。真皮乳头层有轻度水肿,有轻重不等炎性细胞浸润。反应严重时可有严重血管炎表现。
HSV感染的诊断要依据病史、临床表现和实验室检查结果而定。有不洁性交史,而且在生殖器部位出现皮肤红斑和原发性水疱,易复发等不难诊断。必要时可作疱液涂片,培养、接种、免疫荧光检查。血清免疫抗体测定等,均有助于诊断和确定病毒类型。
一、细胞学方法
对皮损刮片做Wright-Gemsa(Tzanck试验)或Papanicolaou染色,可检出HSV感染特征的巨细胞包函体,但不能区别HSV感染或水痘―带状疱疹病毒感染,敏感性仅为病毒分离的60%。
二、培养法
从水疱底部取材做组织培养分离病毒,为目前较敏感、最特异的检查方法,需5-10天,因其技术条件要求高,价格昂贵,不能普遍使用。
三、抗体检测
目前最广泛的是HSV-2抗体检测,如蛋白印迹法也可用gD2作抗原检测HSV-2抗体,具有敏感性,且能区分HSV-1和HSV-2的优点。
四、基因诊断
(一)用PCR分型检测单纯疱疹病毒
PCR是一种敏感性高,特异性强的快速检测方法,标本中含有1fgHSV-DNA就可以检出,其在HSV感染的诊断研究中发展较快,且分型检测HSV是发展的趋势。
1、标本采集和处理
(1)标本采集
①脑脊液:直接无菌采取患者0.5ml脑脊液标本于无菌试管送检.如肉眼可见血色,应离心取上清。
②羊水及婴儿血清:同上,应避免溶血.
③脑组织:脑组织尸检、活检标本,加1mlPBS标本缓冲液研磨后,待检。
④眼及皮肤病灶分泌物:用预测(半干)棉拭子直接取患处分泌物,置1mlPBS标本缓冲液中送检。
⑤生殖器(宫颈、阴道、外阴、阴茎)标本:先用消毒棉拭子擦去病变部位表面粘液、污垢,再用预潮棉拭子用力擦拭患处分泌物,置1mlPBS标本缓冲液中送检。
(2)标本处理
①预处理:所有液体标本均可直接进行模板制备;可以取100μl标本液,离心5000r/min×5min后,去上清,取沉淀物进行模板制备。
②模板制备:a:蛋白酶K消化裂解法:沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液,55℃1h后,煮沸10min,离心5000r/min×5min,收集上清。b:水煮法:沉淀物加100μl蒸馏水,摇均水煮20min,离心5000r/min×5min收集上清。c:1%TritonX-100裂解法:取采集的标本液100μl,加入1μlTritonX-100,水煮20min,5000r/min×5min,收集上清。d:5%NP-40裂解法:取采集的标本液100μl,加5μlNP-40,水煮20min,5000r/min×5min收集上清。e:如标本溶血严重经上述裂解处理后,再加等体积酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀DNA,加10μlDW溶解待检。
2、PCR扩增
(1)引物设计。以HSVDNA聚合酶的高保守区为检测靶序列以确保特异性。设计3个引物,一个上游共同性引物,DNAP5(5′ATGGTGAAAACATCGACATGTACGG3′):二个下游特异性引物,DNAP3-1(5′CCTCGCGTTCGTCCTCGTCCTCC3′)和DNAP3-2(5′CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′),可以分别扩增出HSV-1469bpDNA片段(1981~2359)、HSV-2391bp片段(1561~1953):从二型PCR扩增产物中设计了一个不分型的特异性探针HSVP35‘GGCGTAGTAGGCGGGGATGTCGCG3‘)。
(2)PCR实验体系。取模板10μl:DNAP50.5(0.2μmol/L):DNAP3-10.5μl(0.2μmol/L):DNAP3-20.5μl(0.2μmol/L):4×dNTP8μl(4×200μmol/L):10×dNTP8μl(4×200μmol/L);10×缓冲液10μl:DMSO4μl;加DW65.5μl;石蜡油30μl.。
水煮(96℃~100℃)7min
加TaqDNA聚合酶1μl;(2.5U)
72℃4min

95℃40s

65℃60s→72℃70s
↓33个循环
70℃4min
3.扩增产物的检测和分析
(1)琼脂糖凝胶电泳染色法:取扩增产物20μl加样品缓冲液4μl混匀后,点样于2%琼脂糖凝胶板,70V电泳15~20min,溴化乙锭(EB)染色5min,于紫外灯下观察结果在溴酚蓝后面有一条或二条亮红带为阳性结果,HSV-2带在前,HSV-1带在后,无带则为阴性结果。
(2))XhoI酶谱法:取HSV-1型PCR产物50μl加XhoI50U,37℃1h后,置3%琼脂糖凝胶中,70V电泳15~20min,可产生46bp片段带(引物后面);与正常PCR产物比较,XhoI酶切后的大片段电泳位置前移。
(3)Southern印迹法:PCR产物20μl经电泳分离后,用变性液处理60min,再用中和液处理90min,转移至硝酸纤维素膜上:80℃烤膜2h,42℃预杂交(杂交液中)30min,加入32p标记HSVP3探针后,42℃杂交过夜;次日用1%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X线暗盒内放射性自显影12~15h,显影为阳性,不显影为阴性。
(二)套式PCR
套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction,NP-PCR)是通过“外侧”、“内侧”两对引物,即一对扩增较大DNA片段的“外侧”引物和一对位于扩增产物中再扩增小片段的“内侧”引物,这样两次连续放大可以提高PCR检测的灵敏度,保证产物的特异性。但该方法不能分型,能100%检出HSV-1,50%检出HSV-2,应改进分型检测HSV,更好地在临床应用和基础研究中推广应用。
1、标本处理:
(1)标本采集同上
(2)DNA制备:①脑脊液:取100μlCSF水煮15min,加入250μl无水乙醇,放-30℃10min;离心10000g30min,去上清,30℃干燥后,加入10μlDW;②脑组织细胞:取沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液,56℃作用1h,水煮10min;取上清加入等体积酚一氯仿(V/V),轻摇10min,离心10000r/min×10min;取水相,加入250μlDW溶解。
2、PCR扩增
(1)引物设计:选择HSV1糖蛋白D基因为检测靶基因。
NP-PCR的引物和探针序列
“外”引物
BJHSV1.1ATCACGGTAGCCCGGCCGTGTGACA19-43
BJHGV1.2CATACCGGAACGCACCACACAA218-239
“内引物”
BJHSV1.3CCATACCGACCACACCGACGA51-79
BJHSV1.4CGTAGTTGGTCGTTCGCGCTGAA166-188
探针
BJHSV--125
(2)PCR实验体系和程序:反应体积为50μl;模板10μl;BJHSV1.10.5μl(0.2pmol/L);BJHSV1.20.5μl(0.2pmol/L);10×缓冲液5μl;4×dNTP4μl(4×200mmol/L);DW27μl;石蜡油30μl。循环参数为95℃30s;55℃30s;72℃60s;循环20次,取其扩增产物1μl加入含有BJHSV1.3和BJHSV1.4反应体系中进行套式扩增,先95℃变性2min,循环参数为95℃30s;55℃30s;72℃60s;循环30次后,72℃延伸5min;。
(3)扩增产物分析:
①琼脂糖凝胶电泳染色法:
取扩增产物10μl点样于2%琼脂糖凝胶中,70V电泳15-20min,溴化乙锭染色5min,于紫外灯下观察结果,在溴酚兰后面有一条,或二条亮红条带为阳性结果,HSV-2带在前,HSV-1带在后,无带则为阴性结果。
②Southern印迹法:
PCR产物20μl经电泳分离后,用变性液处理60min,再用中和液处理90min,转移至硝酸纤维素膜上,80℃烤膜2h,42℃预杂交(杂交液中)30min,加入32P标记HSV探针后,42℃杂交过夜,次日用1%SDS/PBSpH7。2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X线暗盒内,放射性自显影12-15h,,显影为阳性,不显影为阴性。
(三)、聚合酶链反应―酶谱法(polymerasechainreaction-endonucleasecleavagePCR-EC)
具有经济广泛等特点;不仅能一次性分型检测HSV-1,HSV-2,EBV,CMV四种病毒,而且方法本身快速、方便、无放射线损伤,易被实验室接受。可检出3个CFU的HSV1,灵敏度高,能检测出中枢神经系统感染第1dCSF中HSVDNA阳性结果,并可用于药物治疗效果的评价。由于病毒的变异性,会出现酶切点突变丢失现象,从而造成酶切阴性结果。对此可以通过型特异性探针或序列分析解决。
1.标本处理
(1)标本采集,方法同上。
(2)DNA模板制备:每份标本取200μl,按200μg/ml加入蛋白酶k,56℃作用1h;
加入等体积的酚―氯仿(v/v)轻摇10min,离心1000r/min×5min;取水相加入500μl(2.5倍体积)无水乙醇,-20℃过夜沉淀DNA,离心15000r/min×5min,吸去液体,30℃干燥后,加蒸馏水25μl溶解,待检。
2.引物设计:
P1,5′CGACTTTGCCAGCCTGTACC3′
P2,5′AGTCCGTGTCCCCGTAGATG3′
(1)PCR实验体系:
反应体积100μl;模板10μl;P10.5μl(10pmol/L),P20.5μl(10pmol/L);4×dNTP4μl(4×200mmol/L);10×缓冲液10μl,DMSD5μl,DW65μl,循环参数为94℃60s;60℃60s;72℃60s;循环40次72℃延伸4min。
(2)扩增产物检测与酶切分型.
①第一步电泳鉴定:取10μlPCR产物加4μl样品缓冲液,加入2%琼脂糖凝胶板,70V电泳(5-20min)加EB染色5min后,紫外灯下观察,可初步鉴定扩增产物大小。
②酶切分析:分别取20μlPCR产物于2个Eppendorf管中,加入50μl无水乙醇,-20℃沉淀DNA,再分别用20μlSmal和BamHI反应缓冲液溶解,加入SmaI或BamHI50U于相应Eppendorf管内,37℃作用1h。
③第二步电泳分型,取10μlPCR酶切物加4μl样品缓冲液,加到2%琼脂糖凝胶中,70V电泳,15-20min后,EB染色5min,与同步加入未酶切的PCR产物相对照。紫外灯下观察,结果如下:
PCR-EC法检测四种病毒结果
病毒型号靶片段SmaIBamHI
HSV1518bp476bp+42bp
HSV2518bp―225+293bp
EBV524bp100bp+424bp277bp+247bp
CMV589bp不需酶切,第一步电泳就可以区分
(四)用RT-PCR检测单纯疱疹病毒
RNA的聚合酶链反应(RNA-PCR),可能通过检测HSV不同期的RNA,这不仅可诊断HSV感染,而且有利于HSV的潜伏期感染机制的深入研究。
RT-PCR是以RNA为模板经逆转录反应(RT)产生cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增以达到检测目的。因此,RNA-PCR也可称为RT-PCR。
1、标本处理:
组织块细胞总RNA提取,取100mg组织标本,加1ml硫氰酸胍变性液,于匀浆器中,室温研磨均匀后,移入2.5mlEppendorf管中。依次加入0.1ml3mol/L(pH4.0)NaAc,1ml水饱和酚和0.2ml氯仿一异戊醇混匀,用力振摇10s,置冰浴15min。10000g4℃,离心20min,取上清水相(上层DNA、下层DNA和变性蛋白质)加入等体积异丙醇置-20℃1h,沉淀RNA。离心15000r/min×10min,弃上清,RNA重新用0.3ml硫氰酸胍变性液溶解,再加0.3ml异丙醇沉淀,-20℃1h,沉淀RNA.离心15000r/min×10min,去上清,沉淀RNA用75%冷乙醇洗一次,真空干燥。.加10μlTE缓冲液(pH7.4)溶解,低温保存备用.临用前冰浴溶解。
2、PCR扩增:
(1)引物设计:选择HSV-1ICPO基因(极早期)为检测靶基因.设计2个引物,
P15′GGATCCTCACGTGGTTACCCGCGGTCT3′
P25′AAGCTTCCGGGGCCGTCCCCGCGGGCG3′可以扩增ICPO中266bp序列。
1个探针:5′CCGGCTGGAGCCGCCGCACCCTGCT3′。
(2)PCR实验体系:总反应体积为50μl,模板10μl(0.25-1.0μg)P11μl(20pmol/L);P21μl(20pmol/L);4×dNTP4μl(200μmol/L);10×缓冲液5μl;AMV(逆转录酶)2μl(50U);DW26μl;循环参数,94℃变性2min后94℃50s,60℃60,72℃60s,循环40次后72℃延伸5min。
3、扩增产物的鉴定:
(1)琼脂糖凝胶电泳染色法:取10μlPCR扩增产物加4μl样品缓冲液,混匀后加样2%琼脂糖凝胶板,70V电泳15-20min,EB染色5min。紫外灯下观察扩增条带。
(2)Southern印迹杂交法:用32P标记的特异性探针检测PCR产物,方法同上。
总之,在HSV感染性疾病的临床诊断中,PCR能对前病毒或潜伏期低复制的HSV特异性靶DNA片段进行扩增检测,远较DNA探针敏感,并能在血清中抗体出现前就可以检出。因此,PCR无论是作为基础研究手段,还是作为临床检验诊断方法,均具有广阔的前景。
五、病理组织学诊断
细胞内水肿,基底层形成大水疱,病灶周围有多核巨细胞浸润,特别是多核白细胞与淋巴细胞充斥于病灶中间。
1.原发性GH
(1)潜伏期:为2~7天,常为3~5天。
(2)好发部位:男性多发生于龟头、冠状沟、尿道口、阴茎体及阴囊。女性好发于外阴、阴道及宫颈。两性均可见于肛周、大腿及臀部。
(3)皮损形态及演变:患处先有烧灼感,随即出现多个群集的红色斑丘疹,并迅速变成小水疱。疱液起初清亮,以后渐变为脓性。水疱易破溃,形成糜烂或浅溃疡,伴明显疼痛。之后结痂而愈,病程约2~4周。
(4)全身症状:发病前或发病时可有全身症状,如发热、头痛、全身不适、颈项强直和骶2~4段感觉异常,或有排尿困难和白带增多。几乎所有患者均可伴腹股沟淋巴结肿大及压痛。
2.复发性GH
约在原发性GH痊愈后1~4个月发生。首次HSV-2感染后1年内近60%的患者复发,第1年内可复发4~6次,以后复发次数减少。eves等发现在生殖器感染者中,HSV-1感染者复发率为14%,而HSV-2感染者则有60%复发。
复发性GH患者可有上述激发因素,或有前驱症状,全身症状较轻,复发部位多在原处,病程也较短,皮损约经10天左右即消退。由于病损反复发作,难以控制,患者易出现精神负担和性功能障碍,甚至发生抑郁症等。但其损害与原发性者甚为相似。
3.特殊型GH
(1)男性同性恋者GH:本病仅次于淋球菌引起的肛门直肠炎。有人从62例有肛门直肠症状但淋球菌检查阴性的男性同性恋者中,29%检出了HSV-2。临床表现多为严重的肛门、直肠疼痛,其他症状为便秘、肛门内有分泌物、里急后重和发热等。部分病人肛周有水疱或溃疡。
(2)孕妇和新生儿GH:孕妇患GH后,其后果严重。对妊娠GH患者HSV-2携带者来说,最重要的是传染给新生儿。当产道内存在HSV-2时,可有40%~60%的新生儿遭受感染,感染严重者可致死亡。
在妊娠早期,患GH的孕妇可影响胎儿,导致流产或死胎。新生儿的先天性感染,出生时可出现带状分布的疱疹、癫痫发作、出血倾向与肝脾肿大。如通过产道感染或胎膜早破而发生逆行感染时,轻者出生后数日至数周可无临床症状,早期可仅有吃奶较差、兴奋,以后可发生病毒血症或疱疹性脑炎,重者发生播散性HSV感染,可出现高热、呼吸困难、出血及中枢神经系统病变,预后不良。
因此,妊娠足月患GH者,如时间允许,应每周从阴道及子宫颈取材,检查有无病毒感染,若细胞学或病毒培养阳性而羊膜尚完整,或破裂后不足6h,建议剖宫产,以避免胎儿经阴道分娩而发生新生儿HSV感染。
HSV-2感染与宫颈癌:有证据表明,生殖器HSV-2感染可能与宫颈癌的发生有关。血清流行病学检查发现,宫颈癌患者血清中抗HSV-2抗体较对照组妇女明显增高。Nahmias等发现,GH患者发生宫颈非典型增生者为对照组的2倍,而发生原位癌者则为对照组的8倍。近年来研究证明,患侵袭性宫颈癌和癌前期病变的妇女宫颈脱落细胞中,HSV-2抗原阳性率明显高于对照组,这种HSV-2抗原位于肿瘤细胞的胞质内,提示为肿瘤细胞表达的病毒抗原。有人发现,宫颈有高度非典型增生、原位癌及鳞状细胞癌者的活检组织中,用间接免疫荧光染色可发现其中的HSV-2抗原。应用DNA-RNA原位杂交技术在宫颈癌和癌前期组织中67%可发现HSV-2特异性mRNA。Frenkel等在宫颈癌组织中检出HSV-2的DNA。还有作者从手术切除后经放射的宫颈癌病变组织中分离出了HSV-2。
HSV-2感染与HIV感染与其他生殖器溃疡性疾病一样,GH增加了HIV感染的危险性。HSV感染是HIV感染的辅助因子。在HIV感染者尤其是HIV感染的同性恋者中,HSV-2感染率更高,且GH的并发症多而严重。在AIDS患者中,耐阿昔洛韦(无环鸟苷)的HSV毒株感染多见。
根据病史、症状和皮肤或黏膜表现,一般不难作出诊断。必要时可进行实验室检查,以明确病原体。
中医病机和辨证本病多因体内蕴热,外感毒邪,热毒相结,肝胆二经湿热下注而生;或因肌肤虚弱,邪毒留肤,遇热即发。
中医辨证分型
1.湿热下注型
主证:患处水疱、糜烂、痒痛交作,大便秘结,小便短赤。舌红,苔黄腻,脉弦滑数。
辨证:湿热下注,外感毒邪。
2.肝肾亏损型
主证:病情反复发作,兼有心烦寐少,腰酸头昏,食少乏味,口干咽燥。舌质淡,脉沉细。
辨证:清热化湿,养肝滋肾。