❶ 成人水痘如何治療,應注意什麼
水痘的治療以對症處理及預防皮膚繼發感染為主,一般不需用葯,但應加回強護理。
因水答痘通過飛沫及接觸傳播。所以如果家中有小孩尚未患過水痘的,應予以隔離至全部皰疹乾燥結痂。
發熱期應卧床休息,給予易消化的飲食和充足的水分,剪短指甲,避免抓傷,勤抵換衣服,保持皮膚清潔。
對症處理方面:高熱時可給予退熱劑。皮膚瘙癢者可口服抗組織胺葯物或塗以爐甘石洗劑。皰疹破裂處可塗以1%龍膽膽紫。忌用腎上腺皮質激素類葯,因其可使皮疹泛化,病情加重。
水痘如無繼發感染者,脫痂後不會留有疤痕。
❷ 皰疹怎麼引起的
主要是病毒引起的,屬於病毒性疾病。生殖器皰疹的危害大,易傳染家庭及其社會其他人,傳播途徑有以下幾種:
1)直接性接觸傳染:通過與生殖器皰疹患者的性接觸傳染,包括性生活、熱烈的接吻、體膚接觸的擁抱。生殖器部位的皮膚粘膜菲薄,血管豐富,性生活時處於極度充血狀態,性生活摩擦可造成細微的損傷,為生殖器皰疹病毒的入侵創造了條件。
2)間接接觸傳染:凡是生殖器皰疹患者使用過的衣服、被褥、馬桶和浴巾等均可能被患者的分泌物污染而帶上生殖器皰疹病毒,與生殖器皰疹病人密切生活在一起的健康人,當輕微的傷口接觸到這些沾有病毒的物品時,就容易感染上。
3)胎盤傳染:患生殖器皰疹的孕婦可通過胎盤而使胎兒傳染生殖器皰疹。孕婦患有生殖器皰疹,未經及時發現和治療,或治療不徹底,生殖器皰疹病毒可通過胎盤的血液循環傳染給胎兒,使胎兒感染生殖器皰疹。
生殖器皰疹的治療醫院。。鄭州警備區醫院唯一的按照國家三甲標准建設的大型性病醫院。
4)血源性傳染:有些在潛伏期的生殖器皰疹患者,體內雖感染有皰疹病毒但可以無臨床表現,健康者或其他各種疾病的病人輸入了由他們提供的血液或血液製品,就可以使受血者感染生殖器皰疹。
5)產道傳染:當胎兒通過感染有生殖器皰疹的產道時,產道部位的生殖器皰疹病毒可通過產道感染給胎兒,導致新生兒感染生殖器皰疹而發病。
❸ 帶狀皰疹應該怎麼治療啊
帶狀皰疹的治療方法包括:
1、抗病毒治療越早越好,72小時內療效相對較好。感染版超過7天,抗病毒治療的意義權不大,一般抗病毒治療7-10天已經足夠;
2、應用維生素B1、B12、甲鈷胺營養神經,促進神經修復;
3、帶狀皰疹常伴有神經性疼痛,應用止痛葯物緩解症狀、改善睡眠;
4、中醫和中葯對帶狀皰疹療效顯著,可以根據病情選用清熱解毒、活血化瘀、止痛的葯物治療,中醫拔罐療法和放血療法也有很好的療效;
5、外用葯物可以起到抗感染、止痛或促進水皰乾涸的作用
❹ 我出了水痘,但沒發熱症狀,很希望去上班,我想知道傳染給同事的幾率會很大嗎
水痘
水痘是春天的流行傳染病,患者多是一至十四歲的孩子,在學校和托兒所較易受感染得病。
病原體:水痘-帶狀瀄疹過濾性病毒
病毒在感染的細胞核內繁殖,形成嗜酸性包涵體,病毒存在於皰疹的皰漿內,血液和咽分泌物中,通過接觸或飛沫傳染,傳染性極強,易感者於接觸後約90%發病。病毒在體外生存能力很弱,能被乙醇滅活,1次患病可獲終身免疫。
現代醫學病理:
病毒經口鼻進入人體,首先在呼吸道粘膜細胞內繁殖,然後進入血液產生病毒血症。水痘的皰疹只限於表皮的棘狀細胞層,有退行性病變和細胞內水腫,形成囊狀細胞,由於細胞的裂解、液化、和組織液的湧入,形成單房性水皰疹(天花則形成多房性皰疹),真皮層有毛細血管擴張和音核細胞浸潤。粘膜疹病變與皮疹相似。
中醫病因病機分析:
中醫認為本病為外感時行邪毒,多由口鼻而入,蘊郁肺脾。肺合皮毛,主肅降,外邪襲肺,宣降失常,初期多見肺衛症狀,如發熱、咳嗽、流涕等。若腸胃伏有濕熱,或病毒深入時,則可出現氣分症狀。脾主肌肉,邪毒與內濕相搏,外發肌表,幫故有水痘布露。本病多屬於風熱輕證,時行邪毒清透即解。因本病邪毒一般只傷及衛、氣分,竄入營血的甚少,故病情較天花、麻疹為輕,預後良好,變證險證也少。少數患兒因毒熱熾盛,內犯氣營,甚或營血受累,重的可伴有高熱、煩躁、面赤,痘點稠密,色赤,紫暗等重症。
治療]
本病無特效治療,主要是對症處理至預防皮膚繼發感染,保持清潔避免瘙癢。皰疹破潰或繼發感染時局部可塗1%甲紫,未破潰者可用爐甘石洗劑塗抹。早期採用阿精胞甘10mg/kg/日或用無環鳥苷8mg/kg/日,用5~7天,或加用干擾素,可抑制病毒的復制。每日肌注維生素B12500~1000ug,也有一定的療效。有繼發感染時可選用有效的抗毒素,水痘不宜使用激素以免引起病毒播散。
❺ 為什麼會得皰疹
1、棘層松解:由於表皮細胞間橋(橋粒及張力細絲等)的,細胞間失去了緊密的聯內系而成松解狀態,容因此形成表皮內的裂隙、水瘡或大抱。引起棘層松解的理由有自身免疫起因,如天皰疹。遺傳起因引起的棘層松解見於慢性家族性良性天癌瘡、毛囊角化病。
2、基底細胞液化及基底膜病變:基底細胞液化是指表皮基底細胞發生空泡化或破碎,重者基底細胞層消失,棘細胞直接與真皮接觸,免疫、遺傳及葯物過敏常是引起基底細胞液化的理由,見於遺傳性大癌性表皮鬆解症、系統性紅斑狼瘡、皮肌炎、多形性紅斑、葯疹、大瘡性扁平苔薛。基底膜病變是指在基底膜有自身抗體沉積或先天性病理缺陷,原由於自身免疫及遺傳,由於基底膜病變引起的水痢疾病有大癌性類天皰疹、妊娠皰疹、原痕性類天皰疹、皰疹樣皮炎、線狀k人大抱病、獲得性大癌性表皮鬆解症、先天性大病性表皮鬆解症、色素失禁症。
3、氣球及網狀:由於細胞內水腫,表皮細胞體積增大,形成氣球狀,細胞膨脹破裂、鄰近殘留的胞膜聯成多數網狀中隔,最後形成多房性水瘡,多見於病毒感染性皮膚病。
4、帶狀皰疹的病因:是由過濾性病毒、外傷、梅毒、脊髓疾病、砒霜中毒引起的。
❻ 這是什麼病
幫助你嗎?
虹膜睫狀體炎
[概述]
前葡萄膜炎(前葡萄膜炎),也被稱為虹膜和睫狀體炎(虹膜睫狀體炎),虹膜發生炎症往往會影響睫狀體,它是一個獨立的臨床虹膜炎或虹膜睫狀體是罕見的。通常在相同的疾病。
[治療]
急性虹膜虹膜睫狀體炎必須診斷的准確性和及時治療前,他們消除失明的危機,以更好地保護視力,其治療原則如下: BR />
1散瞳:一旦確診,立即擴張,使瞳孔擴大,這是主要的治療措施。如果延遲,難免會導致無法挽回的後果。
散瞳葯物阿托品1%阿托品眼葯水,一天三至六倍,直到瞳孔放大,炎症和解決後,每日1次或2次,以保持擴大瞳孔炎症消退後半月一月。合並的目的。
阿托品的睫狀肌機鬆弛,以紓緩壓力的動脈,的葡萄膜炎,以促進血液循環,降低毛細血管通透性,減少滲漏,發揮抗炎作用,促進炎症吸收。此外,散大瞳孔,以防止粘連或消除的形成,緩解或減輕瞳孔括約肌和睫狀肌痙攣。眼睛好好休息,以達到止痛的目的。
滴用阿托品時候,必須壓迫淚囊部,為了避免淚囊和鼻黏膜吸收中毒,特別是對兒童使用的必須是謹慎的,特別是對老年人是一個前房狹窄與青光眼品質,犯錯上側的謹慎。
如阿托品擴瞳,再加上1%的可卡因和0.1%腎上腺等量的粘連混合的0.3毫升,附近球結膜下注射,所謂的強大的瞳孔擴大。
應用皮質類固醇激素:使用糖皮質激素可以減少和控制炎症,起到抗炎和抗過敏的作用,降低毛細血管通透性,減少組織水腫和滲出,減少纖維組織增生和膠原沉積。過敏反應的抑製作用。服葯兩個多星期,而不是??突然停葯。適當減量。
的管理方法:口服葯物,眼葯水或結膜下注射:口服葯開始給予足夠的數量,以迅速控制炎症,最後,最小,最保持炎症活動消散根據。
前葡萄膜炎局部地塞米松0.5%松木或0.05%,每日4?5次,或一小時的時間點,療養減少。有時也可以結膜下注射。
葡萄膜炎或脈絡膜炎患者,可用0.025%地塞米松0.3毫升結膜和眼球筋膜注射,或全身用葯相結合的,病重的氫化可的松200?250毫克或地塞米松5?10mg靜脈滴注,每日一次,所以有足夠的數量可以達到的眼組織。
3。非甾類抗炎劑:水楊酸鈉保泰松和吲哚美辛,鎮痛和抗炎作用。主要抑制前列腺素的增加,以實現的作用,抗炎或降壓,共同阿司匹林0.5克,每日3次,每天消炎痛25mg三次前房中的葡萄膜炎。
4。抗生素:如果系統之前,化膿性葡萄膜炎可局部或全身應用廣譜抗生素。
5。免疫治療:嚴重的葡萄膜炎和交感性眼炎,免疫抑制劑或免疫增強劑,可以考慮使用激素是無效的。要調節免疫功能異常,常用的免疫抑制劑:
的⑴環磷醯胺(環磷醯胺):可單獨使用,或與類固醇治療,常用的口服劑量為50至100mg,每日兩次點服務,即使兩個周為一療程。靜脈注射100?200毫克溶於20毫升生理食鹽水洗滌,每天或每隔一天。血液進行檢查,以防止癲癇發作的副作用。
⑵乙雙嗎啉(AT-1727),各0.4克,1日3次,連服2?3周,停葯一周,然後一兩個療程。
⑶疼痛可以是相當(chlocambucil,Leukeuan,苯丁酸氨芥末的):平均每日自2毫克,重的每天2?10毫克,每日最大劑量不超過20mg。
使用免疫增強劑左旋咪唑對免疫功能低下者。
6。熱敷或短波療法:擴張血管,促進血液循環,促進炎症的吸收。
7。對症治療
口服對乙醯氨基酚醯胺(1)繼發性青光眼眼壓下降。
⑵可行虹膜穿刺或虹膜切除術虹膜膨隆。
⑶周邊虹膜粘連,導致繼發性青光眼可行的周邊虹膜切除術。
⑷炎症控制下行白內障摘除術並發性白內障。
臨床表現
首先,症狀
疼痛,畏光,流淚,視力下降等症狀的疾病。
虹膜睫狀體三叉不是一點點的毒性刺激,睫狀肌的收縮和腫脹組織的壓迫反射到眉毛和臉頰,疼痛,睫狀體部有壓痛,疼痛,夜間尤甚。急性期常伴有角膜炎症反應,羞明流淚視力可突然下降,由於角膜水腫,角膜沉澱物和炎症滲出物的影響光線進入,睫狀肌會發生反射性痙攣,炎症刺激引起假性近視。晚期黃斑水腫,視神經視網膜炎。
的跡象
1。睫狀充血:睫狀充血,嚴重者還可形成混合充血,結膜水腫。
2。角膜沉澱物(角質沉澱,KP):房屋水腫炎性細胞和顏料由於角膜後面和虹膜的表面之間的溫度差,在離心力和重力的影響前房房水對流粗糙角膜內皮細胞粘附炎症,角膜沉澱物。平靜的復雜的多沉積在角膜三角分布的中心的下側,尖端朝向瞳孔區,旁邊大顆粒,小顆粒在上部。
根據炎症的性質,滲出液的嚴重程度,時間的長度,大小和形狀不同的表現形式,數量各不相同。大的灰白色羊脂像KP的特點是慢性炎症,,細灰灰塵像KP多見於急性或過敏性肉芽腫性疾病。個人也正常白的KP,無虹膜炎的表現,生理KP,應該讀結合其他臨床症狀鑒別診斷。
3。房水混濁:炎症的蛋白質含量增加房水,房水變混在裂隙燈蒼白的色彩還原反射反光帶被稱為丁達爾征房水。表現為活動性炎症的跡象。可能是嚴重的纖維素性膿性滲出物沉積液平面的前房積膿(hypopion)的前室的下部,由於重力關系。如果血管破裂,紅細胞溢出,從而產生前房出血(前房積血)。
4。虹膜不清:虹膜炎,虹膜血管擴張水腫浸潤,顏色變暗,虹膜表面紋理不清,肉芽腫性虹膜睫狀體炎,虹膜結節,深深淺淺的。深位於邊緣的瞳孔是半透明的灰色小的說koeppew結節,多見於亞急性或慢性炎症早,數量的多少不同,可以在幾天內消失。虹膜捲曲輪布薩卡結節附近的淺結節。此結節可很快消失,偶爾的老齡化和新生血管形成。炎症反復發作,虹膜萎縮,形成的表面上的機器膜和新生血管,虹膜修復狀態。
5。瞳孔縮小:炎症早在虹膜,虹膜充血,水腫,細胞浸潤,滲出LPS瞳孔括約肌和開放的主要肌肉同時收縮,而表現出瞳孔縮小,對光反應平淡。
6。玻璃體混濁:睫狀體和玻璃體相鄰足虹膜睫狀體細小的灰塵和絮狀滲出和炎症可侵入晶體後腔及玻璃體前,渾濁。
並發症
角膜混濁:後彈力層皺褶性角膜炎和角膜上皮水泡樣病變,晚期角膜帶狀皰疹發生之前。
2。虹膜後粘連:虹膜炎,虹膜瞳孔緣晶體前囊之間的粘連,纖維蛋白滲出。可用於早期粘連擴張劑開設。如果的滲液機公司的附著力擴張劑是不容易拉,拉的粘連,瞳孔的一部分,不是全部的花瓣般的邊緣。
3。瞳孔阻滯(隱居的瞳孔)從來沒有拉虹膜粘連纖維化不開,的學生每周光圈,鏡頭後面的表面是完全粘連,前後房水循環中斷。
4。虹膜周邊前粘連(的虹膜周邊前粘連)或房角粘連(房角粘連)。後房壓力增加或滲出液積聚的周邊虹膜或虹膜與角膜後面粘連。
5。的瞳孔膜門襟(閉塞瞳孔):大量的滲出液,以形成薄的膜,其覆蓋的晶體的前表面的瞳孔區域的沉積。
6。虹膜膨出(虹膜膨隆):由於房水不能流從裡屋,擋在後面的房間,使室內壓力,房水積聚虹膜向前膨隆狀態。
7。並發性白內障:虹膜炎症,房水,房水的炎症有毒性質的變化改變了晶體的外部環境,從而改變晶體正常的生理代謝,導致晶體前後皮質混濁,並很快形成一個完整的白內障。
8。繼發性青光眼:由於房角粘連,瞳孔阻滯,急性炎症的血管擴張,血漿滲出,導致眼壓增高,繼發青光眼房水粘度增加。
9。視網膜病變:病變後期或嚴重的情況下可能會並發黃斑水腫或囊性變,或伴有視盤血管炎。
10。眼球萎縮:附近睫狀體滲出機組織形成纖維膜牽拉性視網膜脫離,破壞睫狀體房水分泌減少,降低眼壓。加上睫狀體本身反復發炎,壞死組織,並引起眼球萎縮,萎縮。
❼ 人們為什麼會患上帶狀皰疹呢
您好,帶狀皰疹是由水痘-帶狀皰疹病毒引起的急性炎症性皮膚病,民間俗稱纏腰蛇,過腰蛇,火丹,在頸部叫鎖頸蛇,中醫叫生蛇。帶狀皰疹後神經痛是指帶狀皰疹發生三個月後疼痛持續存在,發生原因是由於皰疹病毒對周邊神經的破壞,造成神經傳導疼痛的過程異常,嚴重影響患者的生存質量。
❽ 生殖器皰疹的症狀有哪些
一、症狀
HSV感染是一種全身性疾病,病毒經呼吸道、口腔、生殖器粘膜或破損皮膚進入人體,可潛於人體正常粘膜、血液、唾液以及局部感覺神經節和多數器官內,幾乎所有的內臟和粘膜表皮內都可分離到HSV。
原發感染多為隱性,大多無臨床症狀或呈亞臨床表現,僅有少數(約1-10%)可以出現臨床症狀。主要見於免疫功能低下嬰幼兒或嚴重營養不良或有其它感染的兒童,成人罕見。原發感染消退後,病毒可持續潛居體內。正常人中約有半數以上為本病毒的攜帶者,可通過口、鼻分泌物而成為傳染源,由於HSV在人體中不產生永久免疫力,故每當機體抗病能力減退時,如患某種發熱性傳染病,胃腸功能紊亂、月經、妊娠、病灶感染、過度疲勞、情緒環境改變時,體內潛伏的HSV即被激發而發病。
HSV-1主要引起口唇皰疹,咽炎,角膜結膜炎和散發性腦炎,而HSV-2感染主要引起生殖器皰疹,但在臨床上也有相反情況。
HSV感染的潛伏期為1-45天,平均為6天,HSV-1感染主要發生於口角、唇緣、鼻孔等皮膚粘膜交界處,亦可見顏面或口唇,開始局部先有灼癢及輕度緊張感,偶有伴發神經痛。隨即出現紅斑,在紅斑基礎上發生簇集性小丘疹,迅速變為粟粒至綠豆大小的水皰,內容澄清,水皰破裂後出現糜爛面,數日後乾燥結痂。自覺灼癢,偶有倦怠,不適和輕微發熱等全身症狀,癒合可遺留暫時性色素沉著。全病程1-2周左右。
HSV-2感染主要發生於生殖器部位,患部先有燒灼感,很快在紅斑的基礎上發生成群的小水皰,多見男性包皮、龜頭、冠狀溝、陰莖等處,偶見於尿道;女性常見於陰唇、陰蒂、陰道、宮頸等處。水皰可逐漸變成膿皰,約6天左右破潰而形成糜爛或淺的潰瘍,自覺疼痛。病人可發生尿道炎,出現排尿困難。多數人有腹股溝淋巴結腫大疼痛,有的病人可出現發熱、肌肉痛及腦膜炎症狀。如發於女性宮頸者可形成潰瘍壞死,陰道分泌物增多,可有下腹痛。應注意有無宮頸癌發生。孕期患生殖器皰疹時易致流產、早產或死胎,並易使新生兒感染,發生新生兒單純皰疹。本病一般經過3周左右可以痊癒,但常有反復發作,一般原發疹後1-4個月內復發,症狀較原發者輕,范圍亦小,局限於生殖器部位,有時僅有1-2個皰疹,病程亦短,自發病至癒合8-12天。本病也可伴有生殖器以外部位的感染,如口唇、臂部及中樞神經系統等。
二、體征
皮損為紅斑基礎上可見成群的水皰或膿皰或成糜爛及潰瘍。女性患者約90%伴有HSV宮頸炎,宮頸可見發紅、糜爛、潰瘍,有膿性陰道分泌物。有的患者可有腹股溝淋巴結腫大壓痛或體溫升高。皮膚病變也可出現在口唇、手指、臀部、大腿、手臂,甚至眼部與咽喉。並發腦膜炎或橫貫性脊髓炎,一般於發疹後3-12天出現頸項強直等顱內壓增高的現象。
三、潛伏感染和復發
HSV感染人體後1周左右,血中出現中和抗體,3-4周達高峰,可持續多年,這些抗體能清除病毒和使機體康復,但大多數個體不能徹底消滅病毒,也不能阻止復發,病毒以潛伏狀態長期存在宿主體內。不同亞型HSV感染者急性首發生殖器皰疹的臨床過程相似,但生殖器病變復發率不同,首發HSV-2感染者約90%,在12個月內會出現一次復發(平均復發4次),而初次感染HSV-1者僅50%出現類似復發(平均復發次數小於1)。不同個體及同一病人一生中生殖器HSV-2感染的復發率變化很大,大多數年復發5-9次,一般在原發皰疹消退後1-4個月內發生,有些患者受到促發因素,如發熱、月經、日曬、寒冷、某些病毒感染等的影響而復發,其特點是每次復發往往發生在同一部位,復發前可有前驅症狀如局部瘙癢,發疹前數小時感染部位有灼燒,麻刺感。
復發生殖器皰疹(GH)對患者心理影響較大,由於目前尚無預防復發的有效療法及可能有誘發生殖器惡變的危險性,故給患者帶來心理影響,患者多有抑鬱、恐懼等心理障礙,這又直接影響HSV的復發。我們的治療經驗,只要患者堅持規律治療,都能治癒。
四、HSV與HIV感染:
HSV常與HIV-1同時感染,並能促進病情發展,引起嚴重的局部和播散性感染。目前認為HSV是一種調節因素,能激活HIV復制,Heng對6例AIDS合並生殖系統HSV皮膚損害患者進行皮膚活檢,發現角化細胞和巨噬細胞均有HIV-1和HSV-1雜交後使HIV-1保留其感染性,而無需與CD4分子結合即能進入細胞內。此外HSV-1能刺激潛伏型HIV-1,而增加HIV-1/HSV-1共同感染和在組織中的復制。
表皮細胞發生氣球樣變性,其中可見有嗜酸性包涵體。表皮開始為網狀變性形成的多房性水皰,以後聚合為單房性水皰。真皮乳頭層有輕度水腫,有輕重不等炎性細胞浸潤。反應嚴重時可有嚴重血管炎表現。
HSV感染的診斷要依據病史、臨床表現和實驗室檢查結果而定。有不潔性交史,而且在生殖器部位出現皮膚紅斑和原發性水皰,易復發等不難診斷。必要時可作皰液塗片,培養、接種、免疫熒光檢查。血清免疫抗體測定等,均有助於診斷和確定病毒類型。
一、細胞學方法
對皮損刮片做Wright-Gemsa(Tzanck試驗)或Papanicolaou染色,可檢出HSV感染特徵的巨細胞包函體,但不能區別HSV感染或水痘―帶狀皰疹病毒感染,敏感性僅為病毒分離的60%。
二、培養法
從水皰底部取材做組織培養分離病毒,為目前較敏感、最特異的檢查方法,需5-10天,因其技術條件要求高,價格昂貴,不能普遍使用。
三、抗體檢測
目前最廣泛的是HSV-2抗體檢測,如蛋白印跡法也可用gD2作抗原檢測HSV-2抗體,具有敏感性,且能區分HSV-1和HSV-2的優點。
四、基因診斷
(一)用PCR分型檢測單純皰疹病毒
PCR是一種敏感性高,特異性強的快速檢測方法,標本中含有1fgHSV-DNA就可以檢出,其在HSV感染的診斷研究中發展較快,且分型檢測HSV是發展的趨勢。
1、標本採集和處理
(1)標本採集
①腦脊液:直接無菌採取患者0.5ml腦脊液標本於無菌試管送檢.如肉眼可見血色,應離心取上清。
②羊水及嬰兒血清:同上,應避免溶血.
③腦組織:腦組織屍檢、活檢標本,加1mlPBS標本緩沖液研磨後,待檢。
④眼及皮膚病灶分泌物:用預測(半干)棉拭子直接取患處分泌物,置1mlPBS標本緩沖液中送檢。
⑤生殖器(宮頸、陰道、外陰、陰莖)標本:先用消毒棉拭子擦去病變部位表面粘液、污垢,再用預潮棉拭子用力擦拭患處分泌物,置1mlPBS標本緩沖液中送檢。
(2)標本處理
①預處理:所有液體標本均可直接進行模板制備;可以取100μl標本液,離心5000r/min×5min後,去上清,取沉澱物進行模板制備。
②模板制備:a:蛋白酶K消化裂解法:沉澱物加100μl蛋白酶K消化裂解液,55℃1h後,煮沸10min,離心5000r/min×5min,收集上清。b:水煮法:沉澱物加100μl蒸餾水,搖均水煮20min,離心5000r/min×5min收集上清。c:1%TritonX-100裂解法:取採集的標本液100μl,加入1μlTritonX-100,水煮20min,5000r/min×5min,收集上清。d:5%NP-40裂解法:取採集的標本液100μl,加5μlNP-40,水煮20min,5000r/min×5min收集上清。e:如標本溶血嚴重經上述裂解處理後,再加等體積酚-氯仿抽提、冷乙醇沉澱DNA,加10μlDW溶解待檢。
2、PCR擴增
(1)引物設計。以HSVDNA聚合酶的高保守區為檢測靶序列以確保特異性。設計3個引物,一個上游共同性引物,DNAP5(5′ATGGTGAAAACATCGACATGTACGG3′):二個下游特異性引物,DNAP3-1(5′CCTCGCGTTCGTCCTCGTCCTCC3′)和DNAP3-2(5′CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′),可以分別擴增出HSV-1469bpDNA片段(1981~2359)、HSV-2391bp片段(1561~1953):從二型PCR擴增產物中設計了一個不分型的特異性探針HSVP35『GGCGTAGTAGGCGGGGATGTCGCG3『)。
(2)PCR實驗體系。取模板10μl:DNAP50.5(0.2μmol/L):DNAP3-10.5μl(0.2μmol/L):DNAP3-20.5μl(0.2μmol/L):4×dNTP8μl(4×200μmol/L):10×dNTP8μl(4×200μmol/L);10×緩沖液10μl:DMSO4μl;加DW65.5μl;石蠟油30μl.。
水煮(96℃~100℃)7min
加TaqDNA聚合酶1μl;(2.5U)
72℃4min
↓
95℃40s
↓
65℃60s→72℃70s
↓33個循環
70℃4min
3.擴增產物的檢測和分析
(1)瓊脂糖凝膠電泳染色法:取擴增產物20μl加樣品緩沖液4μl混勻後,點樣於2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳15~20min,溴化乙錠(EB)染色5min,於紫外燈下觀察結果在溴酚藍後面有一條或二條亮紅帶為陽性結果,HSV-2帶在前,HSV-1帶在後,無帶則為陰性結果。
(2))XhoI酶譜法:取HSV-1型PCR產物50μl加XhoI50U,37℃1h後,置3%瓊脂糖凝膠中,70V電泳15~20min,可產生46bp片段帶(引物後面);與正常PCR產物比較,XhoI酶切後的大片段電泳位置前移。
(3)Southern印跡法:PCR產物20μl經電泳分離後,用變性液處理60min,再用中和液處理90min,轉移至硝酸纖維素膜上:80℃烤膜2h,42℃預雜交(雜交液中)30min,加入32p標記HSVP3探針後,42℃雜交過夜;次日用1%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X線暗盒內放射性自顯影12~15h,顯影為陽性,不顯影為陰性。
(二)套式PCR
套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction,NP-PCR)是通過「外側」、「內側」兩對引物,即一對擴增較大DNA片段的「外側」引物和一對位於擴增產物中再擴增小片段的「內側」引物,這樣兩次連續放大可以提高PCR檢測的靈敏度,保證產物的特異性。但該方法不能分型,能100%檢出HSV-1,50%檢出HSV-2,應改進分型檢測HSV,更好地在臨床應用和基礎研究中推廣應用。
1、標本處理:
(1)標本採集同上
(2)DNA制備:①腦脊液:取100μlCSF水煮15min,加入250μl無水乙醇,放-30℃10min;離心10000g30min,去上清,30℃乾燥後,加入10μlDW;②腦組織細胞:取沉澱物加100μl蛋白酶K消化裂解液,56℃作用1h,水煮10min;取上清加入等體積酚一氯仿(V/V),輕搖10min,離心10000r/min×10min;取水相,加入250μlDW溶解。
2、PCR擴增
(1)引物設計:選擇HSV1糖蛋白D基因為檢測靶基因。
NP-PCR的引物和探針序列
「外」引物
BJHSV1.1ATCACGGTAGCCCGGCCGTGTGACA19-43
BJHGV1.2CATACCGGAACGCACCACACAA218-239
「內引物」
BJHSV1.3CCATACCGACCACACCGACGA51-79
BJHSV1.4CGTAGTTGGTCGTTCGCGCTGAA166-188
探針
BJHSV--125
(2)PCR實驗體系和程序:反應體積為50μl;模板10μl;BJHSV1.10.5μl(0.2pmol/L);BJHSV1.20.5μl(0.2pmol/L);10×緩沖液5μl;4×dNTP4μl(4×200mmol/L);DW27μl;石蠟油30μl。循環參數為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環20次,取其擴增產物1μl加入含有BJHSV1.3和BJHSV1.4反應體系中進行套式擴增,先95℃變性2min,循環參數為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環30次後,72℃延伸5min;。
(3)擴增產物分析:
①瓊脂糖凝膠電泳染色法:
取擴增產物10μl點樣於2%瓊脂糖凝膠中,70V電泳15-20min,溴化乙錠染色5min,於紫外燈下觀察結果,在溴酚蘭後面有一條,或二條亮紅條帶為陽性結果,HSV-2帶在前,HSV-1帶在後,無帶則為陰性結果。
②Southern印跡法:
PCR產物20μl經電泳分離後,用變性液處理60min,再用中和液處理90min,轉移至硝酸纖維素膜上,80℃烤膜2h,42℃預雜交(雜交液中)30min,加入32P標記HSV探針後,42℃雜交過夜,次日用1%SDS/PBSpH7。2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X線暗盒內,放射性自顯影12-15h,,顯影為陽性,不顯影為陰性。
(三)、聚合酶鏈反應―酶譜法(polymerasechainreaction-endonucleasecleavagePCR-EC)
具有經濟廣泛等特點;不僅能一次性分型檢測HSV-1,HSV-2,EBV,CMV四種病毒,而且方法本身快速、方便、無放射線損傷,易被實驗室接受。可檢出3個CFU的HSV1,靈敏度高,能檢測出中樞神經系統感染第1dCSF中HSVDNA陽性結果,並可用於葯物治療效果的評價。由於病毒的變異性,會出現酶切點突變丟失現象,從而造成酶切陰性結果。對此可以通過型特異性探針或序列分析解決。
1.標本處理
(1)標本採集,方法同上。
(2)DNA模板制備:每份標本取200μl,按200μg/ml加入蛋白酶k,56℃作用1h;
加入等體積的酚―氯仿(v/v)輕搖10min,離心1000r/min×5min;取水相加入500μl(2.5倍體積)無水乙醇,-20℃過夜沉澱DNA,離心15000r/min×5min,吸去液體,30℃乾燥後,加蒸餾水25μl溶解,待檢。
2.引物設計:
P1,5′CGACTTTGCCAGCCTGTACC3′
P2,5′AGTCCGTGTCCCCGTAGATG3′
(1)PCR實驗體系:
反應體積100μl;模板10μl;P10.5μl(10pmol/L),P20.5μl(10pmol/L);4×dNTP4μl(4×200mmol/L);10×緩沖液10μl,DMSD5μl,DW65μl,循環參數為94℃60s;60℃60s;72℃60s;循環40次72℃延伸4min。
(2)擴增產物檢測與酶切分型.
①第一步電泳鑒定:取10μlPCR產物加4μl樣品緩沖液,加入2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳(5-20min)加EB染色5min後,紫外燈下觀察,可初步鑒定擴增產物大小。
②酶切分析:分別取20μlPCR產物於2個Eppendorf管中,加入50μl無水乙醇,-20℃沉澱DNA,再分別用20μlSmal和BamHI反應緩沖液溶解,加入SmaI或BamHI50U於相應Eppendorf管內,37℃作用1h。
③第二步電泳分型,取10μlPCR酶切物加4μl樣品緩沖液,加到2%瓊脂糖凝膠中,70V電泳,15-20min後,EB染色5min,與同步加入未酶切的PCR產物相對照。紫外燈下觀察,結果如下:
PCR-EC法檢測四種病毒結果
病毒型號靶片段SmaIBamHI
HSV1518bp476bp+42bp
HSV2518bp―225+293bp
EBV524bp100bp+424bp277bp+247bp
CMV589bp不需酶切,第一步電泳就可以區分
(四)用RT-PCR檢測單純皰疹病毒
RNA的聚合酶鏈反應(RNA-PCR),可能通過檢測HSV不同期的RNA,這不僅可診斷HSV感染,而且有利於HSV的潛伏期感染機制的深入研究。
RT-PCR是以RNA為模板經逆轉錄反應(RT)產生cDNA,再以cDNA為模板進行PCR擴增以達到檢測目的。因此,RNA-PCR也可稱為RT-PCR。
1、標本處理:
組織塊細胞總RNA提取,取100mg組織標本,加1ml硫氰酸胍變性液,於勻漿器中,室溫研磨均勻後,移入2.5mlEppendorf管中。依次加入0.1ml3mol/L(pH4.0)NaAc,1ml水飽和酚和0.2ml氯仿一異戊醇混勻,用力振搖10s,置冰浴15min。10000g4℃,離心20min,取上清水相(上層DNA、下層DNA和變性蛋白質)加入等體積異丙醇置-20℃1h,沉澱RNA。離心15000r/min×10min,棄上清,RNA重新用0.3ml硫氰酸胍變性液溶解,再加0.3ml異丙醇沉澱,-20℃1h,沉澱RNA.離心15000r/min×10min,去上清,沉澱RNA用75%冷乙醇洗一次,真空乾燥。.加10μlTE緩沖液(pH7.4)溶解,低溫保存備用.臨用前冰浴溶解。
2、PCR擴增:
(1)引物設計:選擇HSV-1ICPO基因(極早期)為檢測靶基因.設計2個引物,
P15′GGATCCTCACGTGGTTACCCGCGGTCT3′
P25′AAGCTTCCGGGGCCGTCCCCGCGGGCG3′可以擴增ICPO中266bp序列。
1個探針:5′CCGGCTGGAGCCGCCGCACCCTGCT3′。
(2)PCR實驗體系:總反應體積為50μl,模板10μl(0.25-1.0μg)P11μl(20pmol/L);P21μl(20pmol/L);4×dNTP4μl(200μmol/L);10×緩沖液5μl;AMV(逆轉錄酶)2μl(50U);DW26μl;循環參數,94℃變性2min後94℃50s,60℃60,72℃60s,循環40次後72℃延伸5min。
3、擴增產物的鑒定:
(1)瓊脂糖凝膠電泳染色法:取10μlPCR擴增產物加4μl樣品緩沖液,混勻後加樣2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳15-20min,EB染色5min。紫外燈下觀察擴增條帶。
(2)Southern印跡雜交法:用32P標記的特異性探針檢測PCR產物,方法同上。
總之,在HSV感染性疾病的臨床診斷中,PCR能對前病毒或潛伏期低復制的HSV特異性靶DNA片段進行擴增檢測,遠較DNA探針敏感,並能在血清中抗體出現前就可以檢出。因此,PCR無論是作為基礎研究手段,還是作為臨床檢驗診斷方法,均具有廣闊的前景。
五、病理組織學診斷
細胞內水腫,基底層形成大水皰,病灶周圍有多核巨細胞浸潤,特別是多核白細胞與淋巴細胞充斥於病灶中間。
1.原發性GH
(1)潛伏期:為2~7天,常為3~5天。
(2)好發部位:男性多發生於龜頭、冠狀溝、尿道口、陰莖體及陰囊。女性好發於外陰、陰道及宮頸。兩性均可見於肛周、大腿及臀部。
(3)皮損形態及演變:患處先有燒灼感,隨即出現多個群集的紅色斑丘疹,並迅速變成小水皰。皰液起初清亮,以後漸變為膿性。水皰易破潰,形成糜爛或淺潰瘍,伴明顯疼痛。之後結痂而愈,病程約2~4周。
(4)全身症狀:發病前或發病時可有全身症狀,如發熱、頭痛、全身不適、頸項強直和骶2~4段感覺異常,或有排尿困難和白帶增多。幾乎所有患者均可伴腹股溝淋巴結腫大及壓痛。
2.復發性GH
約在原發性GH痊癒後1~4個月發生。首次HSV-2感染後1年內近60%的患者復發,第1年內可復發4~6次,以後復發次數減少。eves等發現在生殖器感染者中,HSV-1感染者復發率為14%,而HSV-2感染者則有60%復發。
復發性GH患者可有上述激發因素,或有前驅症狀,全身症狀較輕,復發部位多在原處,病程也較短,皮損約經10天左右即消退。由於病損反復發作,難以控制,患者易出現精神負擔和性功能障礙,甚至發生抑鬱症等。但其損害與原發性者甚為相似。
3.特殊型GH
(1)男性同性戀者GH:本病僅次於淋球菌引起的肛門直腸炎。有人從62例有肛門直腸症狀但淋球菌檢查陰性的男性同性戀者中,29%檢出了HSV-2。臨床表現多為嚴重的肛門、直腸疼痛,其他症狀為便秘、肛門內有分泌物、里急後重和發熱等。部分病人肛周有水皰或潰瘍。
(2)孕婦和新生兒GH:孕婦患GH後,其後果嚴重。對妊娠GH患者HSV-2攜帶者來說,最重要的是傳染給新生兒。當產道內存在HSV-2時,可有40%~60%的新生兒遭受感染,感染嚴重者可致死亡。
在妊娠早期,患GH的孕婦可影響胎兒,導致流產或死胎。新生兒的先天性感染,出生時可出現帶狀分布的皰疹、癲癇發作、出血傾向與肝脾腫大。如通過產道感染或胎膜早破而發生逆行感染時,輕者出生後數日至數周可無臨床症狀,早期可僅有吃奶較差、興奮,以後可發生病毒血症或皰疹性腦炎,重者發生播散性HSV感染,可出現高熱、呼吸困難、出血及中樞神經系統病變,預後不良。
因此,妊娠足月患GH者,如時間允許,應每周從陰道及子宮頸取材,檢查有無病毒感染,若細胞學或病毒培養陽性而羊膜尚完整,或破裂後不足6h,建議剖宮產,以避免胎兒經陰道分娩而發生新生兒HSV感染。
HSV-2感染與宮頸癌:有證據表明,生殖器HSV-2感染可能與宮頸癌的發生有關。血清流行病學檢查發現,宮頸癌患者血清中抗HSV-2抗體較對照組婦女明顯增高。Nahmias等發現,GH患者發生宮頸非典型增生者為對照組的2倍,而發生原位癌者則為對照組的8倍。近年來研究證明,患侵襲性宮頸癌和癌前期病變的婦女宮頸脫落細胞中,HSV-2抗原陽性率明顯高於對照組,這種HSV-2抗原位於腫瘤細胞的胞質內,提示為腫瘤細胞表達的病毒抗原。有人發現,宮頸有高度非典型增生、原位癌及鱗狀細胞癌者的活檢組織中,用間接免疫熒光染色可發現其中的HSV-2抗原。應用DNA-RNA原位雜交技術在宮頸癌和癌前期組織中67%可發現HSV-2特異性mRNA。Frenkel等在宮頸癌組織中檢出HSV-2的DNA。還有作者從手術切除後經放射的宮頸癌病變組織中分離出了HSV-2。
HSV-2感染與HIV感染與其他生殖器潰瘍性疾病一樣,GH增加了HIV感染的危險性。HSV感染是HIV感染的輔助因子。在HIV感染者尤其是HIV感染的同性戀者中,HSV-2感染率更高,且GH的並發症多而嚴重。在AIDS患者中,耐阿昔洛韋(無環鳥苷)的HSV毒株感染多見。
根據病史、症狀和皮膚或黏膜表現,一般不難作出診斷。必要時可進行實驗室檢查,以明確病原體。
中醫病機和辨證本病多因體內蘊熱,外感毒邪,熱毒相結,肝膽二經濕熱下注而生;或因肌膚虛弱,邪毒留膚,遇熱即發。
中醫辨證分型
1.濕熱下注型
主證:患處水皰、糜爛、癢痛交作,大便秘結,小便短赤。舌紅,苔黃膩,脈弦滑數。
辨證:濕熱下注,外感毒邪。
2.肝腎虧損型
主證:病情反復發作,兼有心煩寐少,腰酸頭昏,食少乏味,口乾咽燥。舌質淡,脈沉細。
辨證:清熱化濕,養肝滋腎。